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  • 微粒體定制系列(七)——倉(cāng)鼠肝微粒體Hamster Liver Microsomes

    2025-09-22 引言歡迎來到#齊氏生物#微粒體定制系列短文,倉(cāng)鼠肝微粒體(HamsterLiverMicrosomes)是藥物代謝研究中一種重要但具有特定應(yīng)用場(chǎng)景的體外實(shí)驗(yàn)工具。尤其是經(jīng)由CYP2C酶代謝的藥物,代謝途徑上與人類更高相似性,這是倉(cāng)鼠肝微粒體重要的價(jià)值所在。一、倉(cāng)鼠肝微粒體HamsterLiverMicrosomes倉(cāng)鼠肝微粒體(HamsterLiverMicrosomes)是倉(cāng)鼠肝細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片,含有豐富的藥物代謝I相酶(特別是細(xì)胞色素P450酶系,CYP450)和II相酶...
  • 大鼠肝微粒體制備過程中活性保存的關(guān)鍵因素探析

    2025-09-18 大鼠肝微粒體制備過程中,活性保存是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的核心環(huán)節(jié),其關(guān)鍵因素涵蓋從動(dòng)物處理到最終保存的全流程控制,具體如下:一、動(dòng)物選擇與預(yù)處理成年健康大鼠是制備高活性微粒體的基礎(chǔ),因其肝臟代謝能力強(qiáng)、微粒體含量高。實(shí)驗(yàn)前需禁食24小時(shí)以減少肝糖原干擾,提高回收率。若需誘導(dǎo)酶活性,可在處死前5天腹腔注射多氯聯(lián)苯(PCB),劑量為300mg/kg,以增強(qiáng)細(xì)胞色素P450等代謝酶的表達(dá)。二、低溫操作與緩沖液優(yōu)化全程需在0-4℃冰浴環(huán)境中進(jìn)行,避免酶熱變性。緩沖液需維持適宜離子強(qiáng)度與...
  • 兔肝微粒體在各行業(yè)中都發(fā)揮著重要作用

    2025-09-15 兔肝微粒體富含細(xì)胞色素P450(CYP450)酶系,成為解析外源性物質(zhì)代謝途徑、評(píng)估藥物相互作用與毒性風(fēng)險(xiǎn)的重要生物工具。兔肝微粒體在藥物研發(fā)、環(huán)境毒理、食品安全與基礎(chǔ)生命科學(xué)中發(fā)揮著重要的作用,為人類理解“化學(xué)物質(zhì)在體內(nèi)的命運(yùn)”提供了高效、靈敏的體外模型。一、藥物研發(fā)在新藥開發(fā)早期,兔肝微粒體被廣泛用于評(píng)估候選化合物的體外代謝穩(wěn)定性。通過孵育藥物分子與微粒體,在NADPH供能條件下,模擬肝臟Ⅰ相代謝反應(yīng)(如氧化、還原、水解),快速識(shí)別代謝“熱點(diǎn)”與潛在毒性代謝物。相比全細(xì)胞...
  • 養(yǎng)原代細(xì)胞,您還為貼壁發(fā)愁嗎?

    2025-09-09 引言開學(xué)了,實(shí)驗(yàn)室原代細(xì)胞試驗(yàn)開始了,我的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(培養(yǎng)箱溫度穩(wěn)定在37±0.5℃,細(xì)胞操作環(huán)境無菌,維持在25℃以上)正常,血清、培養(yǎng)基等也按照SOP正確添加,為啥細(xì)胞貼壁效果不太好?一、原代細(xì)胞為什么要包被?貼壁生長(zhǎng)成為原代細(xì)胞體外培養(yǎng)的核心條件,直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和細(xì)胞功能表達(dá)?。在原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中,需要包被處理以增強(qiáng)貼壁能力。二、如何選擇合適的包被材料?為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需要,需要對(duì)培養(yǎng)器皿(培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)板)用不同的物質(zhì)包被后使用,既可以促進(jìn)細(xì)胞...
  • Ⅰ型鼠尾膠原應(yīng)用場(chǎng)景(四)——病理機(jī)制

    2025-09-04 一、Ⅰ型鼠尾膠原Ⅰ型鼠尾膠原(Collagenfromrattail,TypeI)是一種天然的培養(yǎng)基,常用于細(xì)胞培養(yǎng)。它是從大鼠尾部肌腱提取的Ⅰ型膠原蛋白溶液,呈液態(tài),溶解在弱醋酸中保存。它是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的核心成分之一,在體內(nèi)廣泛分布于皮膚、骨骼、肌腱等結(jié)締組織,具有天然的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)可被細(xì)胞表面受體(如整合素α1β1、α2β1)別,從而啟動(dòng)細(xì)胞黏附與信號(hào)傳遞。二、還原病理現(xiàn)場(chǎng)鼠尾膠原通過其三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)(纖維直徑約50-200nm),精準(zhǔn)模擬人體組織中的細(xì)胞外...
  • 超越大鼠模型:為何豬肝微粒體在預(yù)測(cè)人類藥物代謝方面更具優(yōu)勢(shì)?

    2025-08-21 豬肝微粒體在預(yù)測(cè)人類藥物代謝方面展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢(shì),其核心優(yōu)勢(shì)源于種屬間代謝酶的高度相似性、代謝通路的全面覆蓋以及實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷目刹僮餍裕唧w可從以下三方面解析:一、代謝酶同源性:CYP450亞型與人類高度重疊豬肝臟中細(xì)胞色素P450(CYP450)酶系的亞型分布與人類具有顯著相似性。例如,豬肝微粒體中的CYP3A亞家族(負(fù)責(zé)代謝約50%的臨床藥物)與人類CYP3A4的底物特異性高度一致,而大鼠CYP3A1/2的代謝譜與人類存在差異。此外,豬肝微粒體中的UGT(葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶)和S...
  • 小鼠肝微粒體能夠高效模擬藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程

    2025-08-21 在新藥研發(fā)與毒理學(xué)研究領(lǐng)域,小鼠肝微粒體被譽(yù)為探索藥物代謝命運(yùn)的探針,是體外評(píng)估化合物代謝穩(wěn)定性、代謝途徑及藥物相互作用的核心工具。其源自小鼠肝臟細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)碎片,經(jīng)勻漿、離心分離后獲得,富含細(xì)胞色素P450(CYP450)酶系、UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)等Ⅰ相與Ⅱ相代謝酶,能夠高效模擬藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程。一、核心功能:還原體內(nèi)代謝環(huán)境小鼠作為常用的模式生物之一,其肝微粒體中的CYP酶(如CYP3A、CYP2D、CYP2C家族)在功能上與人類部分同工酶具有相似性...
  • 豬肝微粒體能夠幫助更好地理解藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化過程及潛在的毒性反應(yīng)

    2025-08-13 豬肝微粒體是從豬肝臟組織中提取的一種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),主要包含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)。這些微粒體富含多種酶系,尤其是細(xì)胞色素P450酶系(CYP450),它們是參與藥物代謝的關(guān)鍵酶類。通過使用豬肝微粒體,研究人員可以在體外條件下模擬肝臟內(nèi)的生化反應(yīng),從而更好地理解藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化過程及潛在的毒性反應(yīng)。一、制備1、材料準(zhǔn)備選擇新鮮或冷凍保存的豬肝臟作為原料。確保來源可靠,并符合實(shí)驗(yàn)所需的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。準(zhǔn)備必要的實(shí)驗(yàn)器材,如高速離心機(jī)、勻漿器、超聲波破碎儀等,以及各種緩沖液和試劑。2、組織勻漿將豬肝...
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